逆流色譜
任何一種分(fēn)離方法都是基于混合物(wù)中(zhōng)被分(fēn)離組分(fēn)的某種物(wù)理(lǐ)性質(zhì)的不同而實現的。液液萃取避免了樣品的不可(kě) 逆吸附、失活和變性等問題。逆流色譜儀是一種多(duō)功能(néng)性的儀器,它可(kě)以進行一些其他(tā)與色譜無關的分(fēn)離過程,比 如逆流泡沫浮選、逆流萃取等。
1.逆流分(fēn)溶法源于 20 世紀 50 年代多(duō)極萃取技(jì )術(非連續性),多(duō)極萃取設備龐大複雜、易碎、溶劑體(tǐ)系容易乳 化,溶劑耗量大,分(fēn)離時間長(cháng)。後被離心分(fēn)離色譜和螺旋管式逆流色譜逐漸取代。
2.離心分(fēn)離色譜和螺旋管式逆流色譜
離心分(fēn)離色譜和螺旋管式逆流色譜利用(yòng)了離心力場來實現固定相的保留。建立在離心力場作(zuò)用(yòng)基礎上的逆流色 譜分(fēn) 2 種,一種被稱為(wèi)流體(tǐ)靜力學(xué)平衡體(tǐ)系,另一種稱為(wèi)流體(tǐ)動力學(xué)平衡體(tǐ)系。建立在流體(tǐ)靜力學(xué)平衡體(tǐ)系的 逆流色譜儀,被稱為(wèi)離心分(fēn)配色譜儀或 CPC;建立在流體(tǐ)動力學(xué)平衡體(tǐ)系的逆流色譜儀被稱為(wèi) J 型逆流色譜儀 或者 CCC。
按照分(fēn)離柱的旋轉方式可(kě)以分(fēn)為(wèi) J 型逆流色譜儀、正交軸逆流色譜儀、非同步逆流色譜儀、離心分(fēn)離色譜儀; 按照旋轉速度可(kě)分(fēn)為(wèi)高速逆流色譜儀和低速逆流色譜儀。其中(zhōng)不同的逆流色譜儀可(kě)以放置同一類型或者不同類型的 多(duō)個分(fēn)離柱。
逆流色譜是一種特殊的液相色譜技(jì )術,它利用(yòng)特殊的色譜柱實現了液态固定相的有(yǒu)效保留,其遵循基本的色譜 塔闆數理(lǐ)論和經典的色譜公(gōng)式。逆流色譜是利用(yòng)在離心力場的作(zuò)用(yòng)下實現固定相的保留而完成萃取。其中(zhōng) CPC 是 通過離心式旋轉的分(fēn)離柱而實現;J 型逆流通過分(fēn)離柱進行行星式旋轉而實現,其萃取原理(lǐ)如下:
具(jù)有(yǒu)樣品無損失、無污染、高效、快速和大制備量分(fēn)離等優點,被廣泛應用(yòng)于中(zhōng)藥成份分(fēn)離、保健食品生物(wù) 化學(xué)、生物(wù)工(gōng)程、天然産(chǎn)物(wù)化學(xué)、有(yǒu)機合成、環境分(fēn)析等領域。
由于溶劑系統的組合是多(duō)樣的,因而從理(lǐ)論上講可(kě)以适用(yòng)于任何極性範圍内樣品的分(fēn)離,同時在分(fēn)離天然化合 物(wù)方面具(jù)有(yǒu)其獨到之處。
操作(zuò)簡單 儀器操作(zuò)簡單,對樣品的預處理(lǐ)要求低,一般的粗提物(wù)即可(kě)進行制備分(fēn)離或分(fēn)析。
回收率高 不需要固相載體(tǐ),消除了由于樣品在固相載體(tǐ)上的不可(kě)逆吸附和降解造成的損失,理(lǐ)論上樣品的回收率可(kě)達 100%, 在實驗中(zhōng)隻要調整好分(fēn)離條件,一般都有(yǒu)很(hěn)高的回收率。
重現性好 如果樣品不具(jù)有(yǒu)較強的表面活性作(zuò)用(yòng),酸堿性也不強,即使多(duō)次進樣,其分(fēn)離過程都保持很(hěn)穩定,而且重現性相當 好。
分(fēn)離效率高,分(fēn)離量較大 由于其與一般的色譜分(fēn)離方式不同,能(néng)實現梯度洗脫和反相洗脫,亦能(néng)進行重複進樣,使其特别适用(yòng)于制備性分(fēn)離, 産(chǎn)品純度高,制備量大。
高速逆流色譜技(jì )術的應用(yòng)領域
1. 天然産(chǎn)物(wù)有(yǒu)效成分(fēn)的分(fēn)離純化
2. 化學(xué)合成物(wù)質(zhì)的分(fēn)離純化
3. 中(zhōng)藥指紋圖譜和質(zhì)量控制研究
4. 抗生素的分(fēn)離純化
5. 海洋生物(wù)活性成分(fēn)的分(fēn)離純化
6. 放射性同位素分(fēn)離
7. 多(duō)肽和蛋白質(zhì)等生物(wù)大分(fēn)子分(fēn)離以及手性分(fēn)離等
8. 食品功能(néng)成分(fēn)的分(fēn)離純化
9. 農藥殘留物(wù)質(zhì)分(fēn)離純化
色譜儀的特點
高速逆流色譜儀根據不同類型逆流色譜儀的特性以及不同行星力場的特點确定了最佳β值、柱 容積、離心力場、管徑等物(wù)理(lǐ)參數。以實現高保留、大流速、高效率、高效果的目的。并且具(jù)備了一機多(duō)用(yòng)的 功能(néng)特點,在同一款機型上通過更換分(fēn)離柱即可(kě)實現低極性、中(zhōng)級性、高極性以及雙水相的高保留值。